隱藏福利:3個(gè)液相色譜柱的小知識(shí),多了怕

　　本儀個(gè)圓今天掐指一算，好像有段日子沒(méi)有給大家發(fā)福利了，就想著什么樣的福利才是大多數(shù)人都需要的呢？
 

　　最后小編把主意放到了我們行業(yè)內(nèi)的“四大名譜”上，然后又在四大譜里pick了我們的液相色譜！畢竟其他三譜前一陣子都開(kāi)設(shè)了訓(xùn)練營(yíng)，相信小伙伴們都不會(huì)care我的小知識(shí)了！
 

　　而液相色譜柱的使用應(yīng)該是液相的新人同學(xué)都比較頭疼的事，為什么...新買不久的柱子，這么快就要“退休”呢？！其實(shí)也不怪你...是他太脆弱！當(dāng)然你照顧好他也還是會(huì)堅(jiān)守崗位的！而延長(zhǎng)液相色譜柱壽命的問(wèn)題上網(wǎng)一搜也是層出不窮，看來(lái)大家都比較在意這嬌弱的柱子呀！
 

　　然后奉上今天的3個(gè)小知識(shí)，進(jìn)一步的了解色譜柱，說(shuō)不定就能讓他多堅(jiān)持一會(huì)兒哦！(福利在文章底部【小知識(shí)后面】！不要傻傻的直接劃走！)
 

　　01.怎樣提高液相色譜柱的柱效？
 

　　解答：(1)要想提高液相色譜法的柱效，應(yīng)當(dāng)用小而均勻的固定相顆粒填充均勻，以減小渦流擴(kuò)散和流動(dòng)相傳質(zhì)阻力，這是最佳的提升柱效的方法。
 

　　(2)選用低黏度的流動(dòng)相(如甲醇、乙腈等)，也有利于減小傳質(zhì)阻力，提高柱效。
 

　　(3)合適的柱溫也會(huì)影響到柱效。
 

　　(4)降低流速、增加柱長(zhǎng)也可以提高柱效。
 

　　02.液相色譜柱保護(hù)柱有何作用？
 

　　解答：(1)在使用高效液相色譜儀分析檢測(cè)樣品的過(guò)程中，液相色譜柱會(huì)受到來(lái)自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染，從而導(dǎo)致液相色譜柱耐用性差、壽命縮短。來(lái)自于色譜系統(tǒng)的污染主要指：
 

　　a.液相色譜儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒；
 

　　b.流動(dòng)相系統(tǒng)過(guò)濾不*殘留的固體顆粒；
 

　　來(lái)自于樣品的污染主要指：
 

　　a.未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中；
 

　　b.由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對(duì)樣品溶解存在的溶解度差異，導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。
 

　　特別是對(duì)于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測(cè)，因基質(zhì)的復(fù)雜性，色譜柱受污染的情況會(huì)更加嚴(yán)重。
 

　　(2)污染會(huì)導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等，從而帶來(lái)檢測(cè)成本高，測(cè)試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響。
 

　　(3)保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材，使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度，延長(zhǎng)分析柱使用壽命。
 

　　(4)保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間，作用主要兩方面：
 

　　a.截留不溶性顆粒；
 

　　b.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)。
 

　　03.如何測(cè)試液相色譜柱的柱效？
 

　　解答：JJG705-2014《液相色譜儀檢定規(guī)程》中規(guī)定了液相色譜柱柱效的測(cè)試方法，具體測(cè)試方法如下：
 

　　(1)測(cè)試用標(biāo)準(zhǔn)溶液：反相色譜柱測(cè)試用的標(biāo)準(zhǔn)溶液為1×10-4g/mL尿嘧啶、1×10-5g/mL聯(lián)苯和蒽(荼)的甲醇溶液；正相色譜柱測(cè)試用的標(biāo)準(zhǔn)溶液為1×10-2mL/mL甲苯和1×10-4mL/mL硝基苯的正己烷溶液。
 

　　(2)將被測(cè)試的色譜柱接到檢定合格的液相色譜儀器上，反相柱用甲醇+水(85%+15%)為流動(dòng)相，正相柱用正己烷+異丙醇(99.5%+0.5%)為流動(dòng)相，流速為1mm/s(內(nèi)徑為4.6mm色譜柱，流量為1.0mL/min)，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)為254nm，靈敏度選擇適中。儀器穩(wěn)定后，從進(jìn)樣口注入10μL對(duì)應(yīng)的色譜柱測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)溶液，記錄色譜圖。
 

　　(3)柱效(理論塔板數(shù))和色譜峰對(duì)稱性的計(jì)算
 

　　由式(2-1)計(jì)算液相色譜柱柱效理論塔板數(shù)，重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。
 

　　(2-1)中，n為理論塔板數(shù)；tR為色譜峰的保留時(shí)間，時(shí)間測(cè)量需精確到0.02min；為色譜峰半高峰寬；L為色譜柱長(zhǎng)。按照上述條件測(cè)得的色譜圖中，按式2-2計(jì)算色譜峰的不對(duì)稱因子As。
 

　　As=b/α
 

　　(2-2)式中，a，b分別為通過(guò)圖片峰高處、平行于峰底的直線被峰兩側(cè)及峰高截取的兩線段的長(zhǎng)度。
 

　　(4)液相色譜柱性能要求
 

　　柱效：反相色譜柱的理論塔板數(shù)一般在3~4×104m-1范圍內(nèi)，正相色譜柱的理論塔板數(shù)在4~5×104m-1范圍內(nèi)。
 

　　色譜峰對(duì)稱性：被測(cè)峰(蒽)的不對(duì)稱因子As一般在0.8~1.6范圍內(nèi)。